1、开盖前离心，使散落到管子中的冻干粉尽可能聚集到管底；10000rpm或12000rpm，上升到最高点后速度即刻下降，直至停止旋转，整个过程大约30s或者3000-3500rpm离心5min，两种离心方法效果等同，可根据客户实验条件自行选择；

2、采用说明书上面推荐的缓冲液及储存浓度进行冻干粉复溶，复溶剂以及蛋白需平衡至室温后再进行复溶操作，可采用摇晃、颠倒或者低速摇摆平台进行混匀，确保瓶内蛋白全部充分溶解。注：不能使用涡旋仪进行快速震荡或者枪头吹打；

3、此重悬液在4-7°C可保存2-7天，浓度不低于100μg/ml，如要长期保存，建议使用含载体蛋白(如0.1%BSA、10%FBS、5%HSA)的缓冲液(PBS)进一步稀释，如果是做无血清培养或者动物体内实验时，细胞因子中不能含有BSA、FBS和HSA，可以使用5%海藻糖作为载体，然后分装冻存于-20°C至-80°C。注：分装保存时建议使用低吸附的管子，并避免反复冻融；稀释分装浓度不低于10μg/ml，分装体积不低于10μl。

1、为什么要进行离心？

答：大部分细胞因子均为冻干粉状态，冻干粉运输方便，而且比较稳定，可长期保存。但是，在运输的过程中瓶内粉末容易散落到瓶壁或者瓶盖上面，离心是为了让蛋白粉末尽可能聚集到瓶底方便后续进行复溶，减少损失。

2、说明书上面推荐复溶浓度不低于100 μg/ml 这个浓度是指什么？

答：说明书上面复溶浓度不低于100 μg/ml 是指重悬的浓度/储存浓度，不是最终实验的工作浓度，如果希望更低浓度的稀释可以再次使用含载体蛋白的溶液进行稀释、分装和保存。

3、如何保存重新溶解后的重组蛋白？

答：（1）溶解后的重组蛋白分装体积一般建议在10或20 μL左右，浓度不低于10μg/mL。（2）分装后的溶液应储存于低吸附管中，防止蛋白吸附在管上降低蛋白活性。（3）分装后的溶液可保存于–20°C条件下，如果有-80°C冰箱，建议保存在-80°C 冰箱中。

4、蛋白复溶稳定剂海藻糖和BSA怎么选？

答：一般情况下，用于普通细胞培养可以使用含有BSA载体的重组蛋白。当进行某些实验，如无血清培养或动物的体内实验，细胞因子中不能含有BSA，FBS 或HSA等动物或人的蛋白，建议选择5%海藻糖作为载体蛋白。

5、配置载体蛋白的溶液指的是什么溶液呢？水可以吗？

答：水不可。该溶液通常是指pH 近中性，有一定缓冲能力的缓冲液，如PBS等。

6、为何需要将溶解后的重组蛋白分装保存？

答：（1）反复冻融会对重组蛋白的活性造成影响；（2）分装可以避免多次取用可能引起的污染。

7、重组蛋白产品的稳定性如何？

答：（1）重组蛋白大部分均为冻干粉，在室温条件下非常稳定。但是收到产品之后还是建议您将冻干产品保存在-20°C至-80°C。（2）对于大多数产品，重悬后在4°C仅能短期保存。如想长期保存，建议使用含载体蛋白(如0.1%BSA)的溶液稀释已重悬的蛋白，然后分装、冻存于-20°C至-80°C。（3）避免反复冻融，每次冻融均会引起蛋白的部分变性。

8、不同的蛋白复溶方法为何不相同？

答：蛋白的溶解性与很多因素有关，其中比较重要的是pH值和离子强度。如果您所用的复溶液与说明书中所标明的不符，很有可能会造成重组蛋白溶解不完全或者是溶解后蛋白稳定性不好，均会影响重组蛋白活性。说明书上面推荐的复溶剂是经过验证可以保证蛋白能充分复溶的，建议复溶以说明书推荐溶剂进行复溶操作。